Аглютинація крові — це склеювання і осідання у вигляді осаду еритроцитів, бактерій і інших клітин, які несуть антигени.
Процес відбувається під впливом аглютинінів, які є специфічними речовинами. В ролі цих речовин виступають лектини або антитіла.
Можливі види аглютинації при визначенні групи крові
Аглютинація буває специфічної і неспецифічної. У першому випадку реакція відбувається за участю трьох компонентів:
- антигенів;
- антитіл;
- електролітів (застосовується ізотонічний розчин).
Використовуються всі можливі види аглютинації при визначенні групи крові, однак це не єдиний випадок.
З якою метою використовується?
Реакція аглютинації крові застосовується для того, щоб виявити збудника інфекційного захворювання. При цьому він осідає, і його легко виявити в осаді. Цей процес використовується, як уже згадувалося вище, і при визначенні групи крові. Саме про це і піде мова далі.
Які особливості?
Еритроцити містять антигени типу А і В. Вони зв’язуються з антитілами ?-і ? відповідно. Групи крові і реакції аглютинації:
- 1, 0 (?, ?) – відсутні антигени на поверхні еритроцитів;
- 2, А (?) – присутній антиген А й антитіло ?;
- 3, (?) – міститься антиген і антитіло ?;
- 4, АВ (00) – присутні два антигени, антитіла відсутні.
Варто відзначити, що антигени вже спостерігаються у ембріона. Що стосується антитіл, вони з’являються після народження, на першому місяці життя.
Від групи крові залежить сумісність людей. В цьому і полягає причина відторгнення плоду організмом матері. Іншими словами, у неї присутні антитіла до антигенів крові майбутньої дитини. В цьому випадку виникає несумісність. Крім того, група крові обов’язково враховується при переливанні.
Підготовка
Групи крові і реакції аглютинації — сумісні поняття, які найчастіше використовуються в медицині.
Перед тестом важливо дотримуватися певних інструкцій. Слід на час виключити вживання деяких продуктів і лікарських препаратів. Це допоможе зробити результати більш точними. Рекомендації, яких потрібно дотримуватися, призначає лікар. Справа в тому, що у різних лабораторій можуть не збігатися діапазони отриманих значень, тобто вони трохи відрізняються.
Умови для проведення тесту
Щоб група крові була визначена точно, важливо підібрати правильне оснащення. До нього належать:
- фізіологічний розчин і піпетка;
- скляні палички;
- стандартні изогемагглютинирующие сироватки;
- сухі фаянсові тарілки, які розділені на 4 сектори.
Існують вимоги до умов проведення тесту:
- денне освітлення;
- температура в приміщенні вище +16 С;
- використання об’ємів крові і сироватки в співвідношенні 1:10;
- достовірні результати виходять протягом 5 хвилин.
Вище представлені основні умови та інструменти. Аглютинація крові може проводитися декількома способами, і кожен із них висуває індивідуальні вимоги.
Методи
Можливі методи визначення групи крові за допомогою аглютинації:
- стандартний метод;
- перехресна реакція;
- використання цоликлонов;
- експрес-методика із застосуванням набору «Эритротест-группокарт».
Стандартний метод
Аглютинація крові проявляється з використанням еритроцитів пацієнта. Також застосовуються стандартні сироватки, які містять відомі антигени.
На плоску тарілку розміщується по 1 краплі чотирьох сироваток. Потім за допомогою скляних паличок на неї вноситься кров пацієнта, що підлягає дослідженню. В даному випадку зручно використовувати очні піпетки. Слід дотримуватися співвідношення 1:10. Сироватка і кров обережно перемішують. Протягом п’яти хвилин можна проводити оцінку.
Розшифровка результатів тесту простим методом
Після закінчення зазначеного часу в краплях сироватки спостерігається просвітлення. У деяких можна побачити, що аглютинація еритроцитів сталася (дрібні пластівці), в інших вона відсутня.
Існують наступні варіанти:
- реакції немає у всіх пробах сироваток ? 1 група;
- згортання відбулося скрізь, крім 2 проби – 2 група;
- відсутність реакції тільки у 3 пробі – 3 група;
- аглютинація відбулася скрізь – 4 група.
Таким чином, головне — правильно розподілити сироватки. Тоді розшифрувати результат не складе праці. Якщо аглютинація крові проявляється слабо, рекомендується провести аналіз повторно. У випадку з дрібними пластівцями їх розглядають під мікроскопом.
Перехресна реакція
Іноді простим способом неможливо точне визначення групи крові. Аглютинація в такому разі проводиться за допомогою методу перехресної реакції. На відміну від першого варіанта тесту, важливе значення тут мають стандартні еритроцити. Кров пацієнта набирається в пробірку, центрифугируется, а потім піпеткою відкачується сироватка для подальших досліджень.
Вона в кількості 2 крапель поміщається на тарілку, потім в неї додають стандартні еритроцити груп А і Ст. Вміст розмішується шляхом похитування ємності.
Результати методу перехресної реакції
Через п’ять хвилин проби готові до розгляду. Варіанти такі:
- склеювання сталося в обох краплях – 1 група;
- пластівці не спостерігаються ні в одній з проб – 4 група;
- процес помітний у одному зразку – 2 або 3 група (залежно від того, де саме згорнулася кров).
Метод з використанням цоликлонов
Для визначення групи крові аглютинація таким способом проводиться з застосуванням синтетичних замінників сироваток. Вони називаються цоликлонами. В них містяться штучні замінники ?-і ?-агглютинов, відомих як эритротесты (рожевого і синього кольору відповідно). Реакція відбувається між ними та еритроцитами крові пацієнта.
Такий метод є найбільш точним і надійним. В основному він не вимагає повторного проведення дослідження. Оцінка результатів здійснюється аналогічним чином, як у випадку стандартного методу. Особливість полягає в тому, що четверта група крові обов’язково повинна бути підтверджена реакцією зі специфічним синтетичним замінником (анти-АВ). Крім того, в ній не спостерігається склеювання при додаванні розчину хлориду натрію.
Експрес-методика з набором «Эритротест-группокарт»
Розглядаючи можливі методи аналізу при визначенні групи крові, варто зазначити, що даний спосіб має свої особливості. Вони полягають у тому, що результат можна оцінити не тільки в лабораторії, але й у польових умовах. Для проведення дослідження використовується спеціальний набір. Він включає в себе картку з лунками, на дні яких вже присутні висушені реагенти. Крім анти-АВ, анти-А і анти-В, застосовується анти-D, дозволяє визначити резус-фактор.
Цей метод не потребує особливої підготовки, дозволено використовувати кров, взята з пальця, допускається наявність у ній консервантів. Спочатку необхідно внести в кожну лунку по краплині води, щоб розчинити інгредієнти. Після цього додається кров, злегка розмішати. Через три хвилини буде отриманий результат.
Помилкова аглютинація
Іноді дані, отримані після проведення перевірки, не відповідають дійсності. Таке явище залежить від певних факторів.
Виділяють три види помилкової реакції:
-
Псевдоагглютинация. Справжнє склеювання не відбувається, еритроцити просто складаються у вигляді монетних стовпчиків. Якщо додати пару крапель фізіологічного розчину, вони розпадаються. Подібне явище розпізнається під мікроскопом.
-
Холодна аглютинація крові. Така реакція спостерігається в тому випадку, якщо умови для проведення дослідження були несприятливими. Коли температура нижче +16 С, може проявлятися склеювання.
-
Панагглютинация. При наявності інфекції в крові результати тестів можуть бути помилковими. Таке явище також можливо у випадку з онкологічними захворюваннями, при сепсисі.
Аглютинація дуже важлива в медицині. Вона дозволяє не тільки визначати групу крові, але і виявляти збудника захворювань, а також наявність інфекцій. Головне, дотримуватися рекомендацій лікаря при підготовці до даної процедури. Що стосується медичного персоналу, його завдання полягає у створенні сприятливих умов і дотриманні всіх правил. Тільки таким чином можна домогтися точних результатів при виконанні аглютинації крові.
